Мониторинг цитогенетических последствий у больных клещевым энцефалитом, имеющих сахарный диабет 2 типа, в зависимости от полиморфизма генов глутатион-S-трансфераз

Известно, что активные формы кислорода, например супероксид-анион радикал, способны повреждать биологические мембраны клеток и макромолекулы, в том числе белки и ДНК [1]. Установлено, что для больных сахарным диабетом (СД) характерны чрезмерная активация окислительного стресса и снижение антиоксидантной защиты, что ассоциировано с повреждением ДНК клеток, снижением эффективности репарации ДНК и повышенной восприимчивостью к мутагенам [2]. Накопление такого рода мутаций приводит к остановке клеточного цикла, а ошибки ферментов ДНК-репарации индуцируют одно- или двунитевые разрывы ДНК, результатом которых является рост количества клеток с хромосомными или хроматидными структурными аберрациями и микроядрами (МЯ) в хромосомных и цитологических препаратах, что принято называть увеличением цитогенетической нестабильности [3].

Кроме того, показано, что повышенный риск развития СД 2 типа (СД2) зависит от полиморфизма генов глутатион-S-трансфераз, в особенности от носительства в генотипе больного нефункционирующих из-за делеции вариантов генов GSTM1 и GSTT1, что приводит к нарушению синтеза одной из важнейших групп ферментов антиоксидантной защиты [4]. Показано, что развитие у больных СД2 инфекционного процесса и/или действие дополнительных мутагенных факторов также могут сопровождаться существенной активацией окислительного стресса и связанной с ним цитогенетической нестабильностью [5]. Известно, что некоторые инфекционные заболевания, такие как лихорадка Западного Нила, как правило, протекают в клинически более тяжелой форме у больных, имеющих СД2 как фоновое заболевание [6, 7].

В настоящее время установлено, что многие вирусы, включая вирус клещевого энцефалита (КЭ), как в условиях in vitro, так и у больных людей в острый и хронический периоды инфекционного процесса способны вызывать существенное повышение по сравнению со здоровыми людьми числа соматических клеток с цитогенетическими нарушениями, включая лимфоциты периферической крови и различные типы эпителиальных клеток с МЯ [8, 9].

К числу наиболее широко используемых и относительно простых цитогенетических тестов можно отнести определение количества клеток с МЯ в буккальном эпителии [10]. Прямая корреляционная зависимость между числом клеток с МЯ в буккальном эпителии и числом лимфоцитов с МЯ в периферической крови свидетельствует о том, что системные генотоксические эффекты в клетках крови находят свое отражение в эпителиоцитах полости рта [10]. Поэтому определение частоты встречаемости клеток с МЯ можно использовать как прогностический критерий тяжести некоторых воспалительных и инфекционных заболеваний, а также для оценки повышенного риска онкологических заболеваний [10, 11].

Клещевой энцефалит (КЭ) − это острое вирусное природно-очаговое заболевание, сопровождающееся активацией окислительного стресса и увеличением цитогенетической нестабильности [9, 11, 12]. Более того, проведенные нами исследования показали, что число клеток с цитогенетическими нарушениями может прямо зависеть от носительства в генотипе больного неактивных вариантов генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1 [13].

ЦЕЛЬ

Цель исследования заключалась в изучении динамики числа клеток с цитогенетическими нарушениями у больных острым КЭ, имеющих СД2, в зависимости от носительства активных и неактивных вариантов генов глутатион-S-трансфераз (GSTM1 или GSTT1) в генотипе больного.

МЕТОДЫ

Дизайн исследования

Проведено поперечное выборочное клиническое обсервационное исследование.

Условия проведения

Исследование проведено среди больных острым КЭ, не имеющих или имеющих фоновую соматическую патологию – СД2 (группы 3 и 4). Участников исследования отбирали методом сплошной выборки среди взрослых пациентов, госпитализированных в инфекционные отделения городских и районных больниц Томской и Тюменской областей в весенне-летне-осенний периоды эпидсезонов клещевых нейроинфекций 2015–2017 гг. Группа здоровых лиц (контроль 1) была отобрана на базе поликлиники во время профилактического осмотра. Отбор больных СД2 (контроль 2) для исследования проводился в те же временные интервалы, что и в основные группы, с использованием метода сплошной выборки среди пациентов, находящихся на амбулаторном учете у эндокринолога по этой патологии на базах эндокринологических диспансеров Томской и Тюменской областей.

Отбор участников исследования проводился на базах инфекционных отделений ОГАУЗ «Городская клиническая больница №3 им. Б.И. Альперовича» (г. Томск), ОГАУЗ «Стрижевская городская больница» (г. Стрижевой Томской области), БУ Ханты-Мансийского автономного округа Югры «Кондинская районная больница» (пгт. Междуреченский, Кондинский район, Тюменская область), ГБУЗ ТО«Областная инфекционная клиническая больница» (г. Тюмень), амбулаторно-поликлинического эндокринологического отделения ОГАУЗ «Томская областная клиническая больница» (г. Томск), ГБУЗ ТО «Эндокринологический диспансер» г. Тюмени и отделения профосмотров ГБУЗ ТО «Областная клиническая больница № 1» (г. Тюмень).

Критерии соответствия

Критериями включения для групп больных острым КЭ в исследование служили: лихорадочная форма заболевания, отсутствие менингеальной и очаговой симптоматики, отсутствие микст-инфекции с иксодовым клещевым боррелиозом (ИКБ) и/или анаплазмозом человека, обнаружение антигена и/или иммуноглобулинов IgM или одновременно IgM и IgG к вирусу КЭ в диагностических титрах методом иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотке крови пациента; отрицательные результаты исследования ИФА на определение в сыворотке крови IgM или/и IgG к боррелиям ИКБ в сыворотке крови, постоянное место жительство на территории Томской или Тюменской областей, получение информированного согласия на участие в исследовании, отсутствие тяжелых сопутствующих заболеваний (инфаркта миокарда, мерцательной аритмии, острого нарушения мозгового кровообращения, гипертиреоза, эпилепсии, острых и обострения хронических воспалительных заболеваний, онкопатологии, туберкулеза, хронических вирусных гепатитов В и С, ВИЧ-инфекции, хронического алкоголизма и наркомании), а также исключение курения и профессиональной деятельности, связанной с ионизирующим излучением или вредными химическими веществами.

Критериями включения для больных СД2 были следующие параметры: получение информированного согласия на участие в исследовании, верификация диагноза СД2 с диспансерным наблюдением в течение не менее 2–3 лет, получение сахароснижающей терапии, уровень гликированного гемоглобина (НbА_1с) не более 7%, отсутствие кетоацидоза, тяжелых сопутствующих заболеваний, а также исключение курения и профессиональной деятельности, связанной с ионизирующим излучением или вредными химическими веществами.

Критериями включения для контрольной группы 1 служили: отсутствие присасываний иксодовых клещей и/или заболевания КЭ или ИКБ в прошлом, отрицательные результаты исследования на маркеры КЭ и ИКБ в ИФА, получение информированного согласия на участие в исследовании, отсутствие СД и других соматических сопутствующих заболеваний средней или тяжелой степени тяжести, отсутствие инфекционных или обострения соматических заболеваний, а также исключение курения и профессиональной деятельности, связанной с ионизирующим излучением или вредными химическими веществами.

Критериями исключения из данного исследования были: отсутствие добровольного информированного согласия пациента на участие в исследовании, несоответствие критериям включения или отказ больного от взятия материала буккального эпителия на исследование.

Продолжительность исследования

Амбулаторное наблюдение за участниками исследования продолжалось на протяжении 1 мес для групп контроля и 6 мес для больных КЭ. Материал для исследования (пробы клеток буккального эпителия) был получен в динамике при обращении к врачу (в случае КЭ –в первые 1–2 дня при госпитализации в стационар), а также спустя 1 нед, 1, 3 и 6 мес. В связи с различными обстоятельствами у нескольких участников исследования повторное получение материала для цитогенетического анализа осуществить не удалось. В общей сложности через 6 мес из 74 участников, первоначально включенных в группу 3, выбыли 19 человек, а из 64 лиц в группе 4 было исключено 17 пациентов.

Описание медицинского вмешательства

Пробы клеток буккального эпителия получали с помощью двух одноразовых стерильных шпателей, делая соскобы со слизистой оболочки левой и правой щек выше линии смыкания зубов [10, 11].

Основной исход исследования

В результате исследования в динамике на протяжении до 6 мес оценивали число буккальных клеток с МЯ (в ‰) в зависимости от присутствия в генотипе индивидуума (больного острым КЭ, имеющего или не имеющего фоновый СД2, больного СД2 или здорового участника исследования из контрольных групп) нормальных GSTM1(+) и GSTT1(+) или мутантных нефункционирующих генов –GSTM1(0) и GSTT1(0) ферментов глутатион-S-трансфераз.

Анализ в подгруппах

В зависимости от результатов ПЦР-анализа и определения носительства в генотипе активных или неактивных вариантов генов глутатион-S-трансфераз каждая из четырех обследованных групп (группы 1, 2, 3 и 4)была, в свою очередь, подразделена на 4 подгруппы: GSTM1(0)/GSTT1(0), GSTM1(+)/GSTT1(0), GSTM1(0)/GSTT1(+) и GSTM1(+)/GSTT1(+).

Сравнение проводилось не только между основными группами больных КЭ, имеющих и не имеющих СД2 (группы 4 и 3) или между основными и контрольными группами 1 и 2, но и между подгруппами, когда оценивали число клеток с цитогенетическими нарушениями у лиц, имеющих активные варианты генов GSTM1(+)/GSTT1(+) и неактивные их сочетания – GSTM1(0)/GSTT1(0), GSTM1(+)/GSTT1(0), GSTM1(0)/GSTT1(+).

Контрольные группы (контроль 1 и 2) были сопоставимы с основными группами (группы 3 и 4) по полу и возрасту. Кроме того, подгруппы участников, отличающихся друг от друга в зависимости от носительства в генотипе неактивных или активных вариантов генов GSTM1(0)/GSTT1(0), GSTM1(+)/GSTT1(0), GSTM1(0)/GSTT1(+) и GSTM1(+)/GSTT1(+), также были сопоставимы по возрасту и полу.

Курсы терапии у больных острым КЭ (группы 3 и 4) соответствовали методическим указаниям, утвержденным Департаментами здравоохранения Томской и Тюменской областей. Больные КЭ после госпитализации придерживались постельного режима на протяжении 1–2 нед.

Все пациенты с СД2, включенные в исследование, находились под диспансерным наблюдением по поводу этого заболевания в течение не менее 2–3 лет, диагноз СД2 в анамнезе был подтвержден тестами на гликемический контроль, уровень НbА_1с в крови и заключением консультации эндокринолога. Пациенты с СД2 из контрольной группы 2 были сопоставимы по показателям гликемического контроля с пациентами из группы наблюдения 4. Все больные СД2 получали терапию метформином или производными сульфонилмочевины. Контроль гликемического профиля проводился у всех участников исследования в течение всего периода наблюдения. Целью сахароснижающей терапии являлось достижение и поддержание уровня НbА_1с менее 7% путем использования метформина и производных сульфонилмочевины.

Методы регистрации исходов

Полученный материал проб клеток буккального эпителия использовали для выделения ДНК и полимеразной цепной реакции (ПЦР) с целью определения вариантов генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1 в генотипе. Кроме того, для получения цитологических препаратов и микроядерного анализа пробы буккальных клеток помещали в два контейнера, помеченных «левая щека» и «правая щека», которые содержали фиксатор Саккоманно (Diapath, Италия) [10].

Известно, что гены глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1 могут иметь относительно протяженные делеции, приводящие к утрате функционирования этих генов, которые обычно обозначают как «нулевые» аллели GSTM1 (0/0) или GSTT1 (0/0) [14]. Делеционные варианты генов GSTM1 (GenBank № X68676) и GSTT1 (GenBank № AP000351) были идентифицированы в мультиплексной ПЦР [14]. ДНК выделяли из проб клеток буккального эпителия согласно стандартному протоколу. В амплификационную пробу вносили две пары праймеров, что давало возможность одновременно амплифицировать фрагменты каждого из указанных генов. Разделение продуктов амплификации и продуктов рестрикции ампликонов проводили в 3% агарозном геле, приготовленном на однократном трис-боратном буфере с добавлением бромистого этидия и визуализацией в проходящем ультрафиолетовом свете (длина волны 380 нм) с применением камеры для горизонтального электрофореза ЕС 12-13 («Биоком», РФ). Нормальные аллели генов, обозначенные знаком «+», характеризуются присутствием ПЦР-продуктов – фрагментов размером 271 и 480 пар оснований. Такие доноры могут быть либо гетерозиготны (GSTM1 (+/0) и GSTT1(+/0)), либо гомозиготны (GSTM1 (+/+) и GSTT1(+/+)) по нормальному активному аллелю и имеют функционирующие гены глутатион-S-трансфераз. Мутантный гомозиготный генотип GSTM1(0/0) или GSTT1(0/0) означает отсутствие на электрофореграмме вышеуказанных фрагментов генов в результате их делеции, что приводит к резкому снижению активности соответствующего фермента глутатион-S-трансфераз [14].

Для микроядерного анализа суспензию клеток буккального эпителия трижды центрифугировали с последующим добавлением к осадку буферного раствора с pH 7,0, содержащего 1,6 г/л Трис-HCl, 38,0 г/л тетранатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) и 1,2 г/л хлорида натрия, растворенных в деионизированной стерильной воде. Клетки фиксировали с помощью смеси этанола и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3:1 и с помощью пипетки наносили на чистые и высушенные предметные стекла [10, 11]. Полученные препараты окрашивали по методу Фельгена и анализировали частоту клеток с МЯ в не менее чем 1000 буккальных эпителиоцитах в соответствии со стандартной методикой [11] с помощью микроскопа PrimoStar (Carl Zeiss, Германия) при увеличении в 1000 раз. К основным критериям идентификации МЯ отнесены следующие признаки: одинаковая структура и интенсивность окраски основных ядер и МЯ, диаметр МЯ варьировал от 1/16 до 1/3 диаметра одного из основных ядер, МЯ имели четкие границы и не были соединены с основными ядрами [11].

Для определения уровня НbА_1с применялся метод иммунотурбидиметрии. Контроль глюкозы в сыворотке венозной крови проводился глюкозооксидазным методом.

Этическая экспертиза

Исследование было одобрено Этическим комитетом ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России (протокол № 4308 от 19.10.2015 г.) и проводилось после получения информированного согласия на участие в исследовании в соответствии с правилами «О порядке проведения биомедицинских исследований у человека» (2002 г.) и «Правилами клинической практики» (Приказ Минздрава РФ № 266 от 19.06.03).

Статистический анализ

Принципы расчета размера выборки: минимальный размер выборки предварительно рассчитывался с помощью пакета статистических программ Statistica v.10 (StatSoft Inc., США) [15].

Методы статистического анализа данных. Статистическую обработку осуществляли с использованием пакета статистических программ Statistica v.10 (StatSoft Inc., США) [15]. Частоты гаплотипов рассчитывали с помощью программы «The EH Software Program» (Rockefeller University, США). Все количественные показатели исследования обрабатывали с применением однофакторного дисперсионного анализа ANOVA и t-критерия Стьюдента для зависимых выборок, поскольку тестирование закона распределения при помощи критерия Колмогорова-Смирнова не выявило отличий от нормального. Различия сравниваемых результатов (Xs_x , где X– выборочное среднее, а s_x – стандартная ошибка) считались достоверными при достигнутом уровне значимости р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Объекты (участники) исследования

Контрольные группы 1 и 2 включали соответственно 57 здоровых лиц (26 мужчин и 31 женщина, средний возраст – 46,2±2,3 года) и 61 больного СД2 (27 мужчин и 34 женщины, средний возраст – 47,8±3,1 года). В группу 3 были включены 74 больных лихорадочной формой острого КЭ (33 мужчины и 41 женщина, средний возраст –45,5±2,3 года), без сопутствующего СД2. Группа 4 состояла из 64 больных лихорадочной формой КЭ, у которых был диагностирован СД2 (29 мужчин и 35 женщин, средний возраст – 49,3±2,7 года). Основные группы были сопоставимы с группами контроля по полу и возрасту. Кроме того, пациенты с СД2 из контрольной группы 2 были сопоставимы по показателям гликемического контроля и НbА_1с с пациентами из группы наблюдения 4 и на момент начала исследования имели уровень НbА_1с не более 7%. В зависимости от результатов ПЦР-анализа каждая из четырех обследованных групп была дополнительно подразделена на 4 подгруппы, включавших от 10 до 22 лиц (табл. 1): GSTM1(0)/GSTT1(0), GSTM1(+)/GSTT1(0), GSTM1(0)/GSTT1(+) и GSTM1(+)/GSTT1(+). В каждой из подгрупп обследованные лица также были сопоставимы по возрасту и полу.

Таблица 1. Динамика числа клеток буккального эпителия с микроядрами у больных острым клещевым энцефалитом, имеющих (группа 4) или не имеющих (группа 3) сахарного диабета 2 типа, в зависимости от полиморфизма генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1 в сравнении с контролем (Xs± _x )

Примечания: КЭ – клещевой энцефалит; МЯ – микроядра; СД2 – сахарный диабет 2 типа. Значимые отличия числа клеток с микроядрами отмечены одним символом при p<0,05 и двумя символами при p<0,01: знаком (*) отмечены отличия в группах 2, 3 и 4 от контроля 1; знаком (^) отмечены отличия группах 3 и 4 от контроля 2; знаком (#) отмечены отличия в подгруппах, имеющих геноварианты GSTM1(0)/GSTT1(0), GSTM1(+)/GSTT1(0), GSTM1(0)/GSTT1(+), от подгруппы с активным генотипом GSTM1(+)/GSTT1(+); подчеркиванием отмечены отличия руппы 4 от группы 3.

Основные результаты исследования

Установлено, что в подгруппе больных СД2 (контроль 2), являющихся носителями нефункционирующих генов GSTM1(0) и GSTT1(0), по сравнению с соответствующей подгруппой здоровых лиц (контроль 1) было обнаружено статистически значимое увеличение числа буккальных клеток с МЯ (P=0,016) (см. табл. 1). Между остальными тремя подгруппами контроля 1 и 2, отличающимися в зависимости от геновариантов глутатион-S-трансфераз, достоверных различий в частоте клеток буккального эпителия обнаружено не было (P>0,05). У всех больных КЭ, которые как имели, так и не имели сопутствующий СД2 (группы 4 и 3), вне зависимости от подгрупп, отличающихся друг от друга по вариантам генов GSTM1/GSTT1, в первые дни заболевания было обнаружено значительное увеличение числа буккальных клеток с МЯ по сравнению с соответствующими группами здоровых лиц (контролем 1) и больных СД2 (контролем 2)(р<0,001 во всех случаях) (см. табл. 1).

Более того, при поступлении в стационар во всех подгруппах больных КЭ, отличающихся в зависимости от геновариантов глутатион-S-трансфераз, имеющих СД2 (группа 4), частота клеток с МЯ была значительно выше, чем в соответствующих подгруппах больных КЭ, которые не имели СД2 (P<0,001). Оценка числа клеток с цитогенетическими нарушениями в динамике показала, что у больных КЭ (группа 3), имевших генотипы GSTM1(0)/GSTT1(0) или GSTM1(0)/GSTT1(+), повышенное по сравнению с соответствующими показателями в контрольной группе 1 количество буккальных клеток с МЯ сохранялось в течение 3 мес после начала заболевания (P<0,001 и P=0,012). У больных КЭ из группы 3 с активными вариантами генов GSTM1(+)/GSTT1(+) число клеток с цитогенетическими нарушениями не отличалось от контрольных значений уже через 1 мес (P>0,05). В группе 4 больных КЭ, имеющих СД2, с генотипами GSTM1(0)/GSTT1(0) или GSTM1(0)/GSTT1(+) существенное увеличение числа буккальных клеток с МЯ по сравнению с соответствующими значениями этого показателя в контроле сохранялось наиболее длительно – в течение 6 мес (р<0,001 и р=0,004).

Дополнительные результаты исследования

Сравнение частоты буккальных клеток с МЯ между 4 подгруппами больных СД2 в группе 2 с различными геновариантами глутатион-S-трансфераз показало, что наиболее высокие показатели микроядерного теста были зарегистрированы у носителей нулевых вариантов (0,52±0,04 ‰), а самые низкие – у больных с нормальными вариантами генов GSTM1(+)/GSTT1(+) (0,19±0,06 ‰, р<0,001).

В группе 3 больных КЭ (см. табл. 1), не имеющих сопутствующего СД2 и являющихся носителями только неактивного варианта GSTM1 (GSTM1(0)/GSTT1(+)) или нефункционирующих вариантов обоих генов (GSTM1(0)/GSTT1(0)), было выявлено существенное увеличение числа буккальных клеток с МЯ по сравнению с соответствующей подгруппой больных КЭ, имеющих активные варианты этих генов (GSTM1(+)/GSTT1(+)) (P<0,001). Такая же закономерность отмечалась и для больных КЭ, имеющих сопутствующий СД2 в группе 4. У больных КЭ, имеющих сопутствующий СД2, и являющихся носителями неактивного GSTM1(0) (GSTM1(0)/GSTT1(+)) или нефункционирующих вариантов обоих генов GSTM1(0)/GSTT1(0), частота клеток с цитогенетическими нарушениями была существенно выше, чем в подгруппе больных КЭ, имеющих генотип GSTM1(+)/GSTT1(+) (р=0,006).

Нежелательные явления

Нежелательных побочных явлений или осложнений при взятии материала на исследование установлено не было.

ОБСУЖДЕНИЕ

Резюме основного результата исследования

Таким образом, показатель числа буккальных клеток с МЯ, отражающий цитогенетическую нестабильность, у пациентов с КЭ и фоновым СД2, по-видимому, связан с полиморфизмом генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1. Больные КЭ, в особенности те из них, которые имеют сопутствующий СД2 и являются носителями неактивных вариантов генов GSTM1(0)/GSTT1(0) или сочетания GSTM1(0)/GSTT1(+) в генотипе, отличаются от остальных подгрупп участников исследования наиболее длительным (на протяжении до полугода) и наиболее выраженным увеличением частоты буккальных клеток с МЯ. В остальных обследованных подгруппах больных КЭ, в первую очередь тех из них, которые не имели СД2 и обладали функционирующими вариантами генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1, число буккальных клеток с МЯ, которые, по-видимому, являлись отражением чрезмерной активации окислительного стресса, имели существенно менее выраженные и продолжительные изменения.

Обсуждение основного результата исследования

Известно, что гипергликемия при СД2 связана с повышением уровня повреждения ДНК и образования МЯ в различных типах клеток, что, по-видимому, обусловлено активацией окислительного стресса и подавлением системы ДНК-репарации [1, 5, 16]. Предполагают [17], что чрезмерная активация окислительного стресса при СД2 способствует разрушению глутатиона и снижению антиоксидантной и антимутагенной функций глутатион-S-трансфераз. Установлено, что острый КЭ сопровождается активацией окислительного стресса и существенным увеличением числа соматических клеток с цитогенетическими нарушениями [9, 12]. Более того, установлено, что количество клеток с МЯ может зависеть от носительства в генотипе человека неактивных вариантов генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1 [13]. Поэтому результаты проведенного нами исследования впервые продемонстрировали, что сочетанное действие у больных КЭ нескольких факторов, включающих сопутствующий СД2 и носительство нефункционирующих генов глутатион-S-трансфераз GSTM1 и GSTT1, приводит к наиболее выраженному и продолжительному повышению уровня клеток с цитогенетическими нарушениями.

Ограничения исследования

Вместе с тем наблюдаемые цитогенетические эффекты у больных СД2 и КЭ могут быть связаны не только с изменением активности генов глутатион-S-трансфераз, но и с нарушением функционирования систем ДНК-репарации, апоптоза и иммунитета, а также с их способностью устранять цитогенетически дефектные клетки [1].Кроме того, в проведенном нами исследовании у больных СД2 не было обнаружено различий между пациентами, относящимися к различным половым и возрастным группам. Мы постарались также минимизировать действие ряда других факторов, которые потенциально могли бы повлиять на результаты исследования, включая обострение воспалительных заболеваний, курение и воздействие ионизирующего излучения или вредных химических веществ. Все эти параметры являлись критериями исключения для участников данного исследования. Вместе с тем повышенная цитогенетическая нестабильность и чувствительность к генотоксическим факторам на работе или в быту больных СД потенциально могут существенно отразиться на состоянии их здоровья, способствовать развитию онкологических заболеваний и нарушению генетической полноценности генеративных клеток [18]. Все эти проблемы требуют более пристального изучения. Микроядерный анализ как экспресс-метод позволяет в первом приближении дать ответ на некоторые из этих вопросов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Наиболее выраженное и длительное сохранение повышенного числа клеток с цитогенетическими нарушениями было установлено в группе больных острым КЭ с сопутствующим СД2, которые являлись носителями генотипа с неактивными вариантами генов глутатион-S-трансфераз GSTM1(0) и GSTT1(0).

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Источник финансирования. Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 16-44-700149).

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Участие авторов. Ильинских Н.Н. – концепция и дизайн исследования, статистическая обработка; Ильинских Е.Н. – анализ полученных данных, написание и редактирование текста; Костромеева М.С. – сбор и обработка материалов.

Благодарности. Авторы выражают благодарность врачам медицинских учреждений Томской и Тюменской областей за помощь в отборе участников исследования.