diaendoСахарный диабетDiabetes mellitus2072-03512072-0378Endocrinology research centre10.14341/DM8032diaendo-8032Research ArticleДиагностика, контроль, лечениеDiagnosis, control, treatmentДиагностическая ценность применяющихся в России методов исследования антител к антигенам β-клеток. Классический иммунофлюоресцентный метод определения антител к островковым клеткам, радиоиммунный метод определения антител к глутаматдекарбоксилазе и иммуноферментные методы определения антител к тирозинфосфатазе и инсулинуDiagnostic value of islet autoantibody assays practised in Russia. 1. Classic immunofluorescence islet cell antibody assay, immunoradiometric glutamic acid decarboxylase antibody assay, and ELISA tyrosine phosphatase antibody and insulin antibody assayshttps://orcid.org/0000-0002-6861-9630ТимофеевАлексей ВалентиновичTimofeevAlexei V.

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник Института молекулярной медицины Первого МГМУ им. Сеченова

alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-5986-4976ГорстКсения АндреевнаGorstKsenia A.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-5939-0646УваровВалентин ЮрьевичUvarovValentin Y.alvaltim@gmail.comПронинаЕкатерина АлександровнаProninaEkaterina A.

Врач

alvaltim@gmail.comВитебскаяАлиса ВитальевнаVitebskayaAlisa V.alvaltim@gmail.comПоповичАнастасия ВладимировнаPopovichAnastasiya V.

Врач

alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-8500-4841ТюльпаковАнатолий НиколаевичTiulpakovAnatoliy N.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1346-7545ЗубковаНаталья АнатольевнаZubkovaNatalia A.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-9189-4596ГиоеваОлеся АнатольевнаGioevaOlesya A.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-7747-6873ТихоновичЮлия ВикторовнаTikhonovichYulia V.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-3259-4443ИльинАлександр ВикторовичIlinAlexander V.alvaltim@gmail.comЛатышевОлег ЮрьевичLatyshevOleg Y.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1578-5870ОкминянГоар ФеликсовнаOkminjanGoar F.alvaltim@gmail.comКаболоваКсения ЛьвовнаKabolovaKsenia L.

Клинический ординатор

alvaltim@gmail.comКаноковаДжулианна АльбертовнаKanokovaJulianna A.

Клинический ординатор

alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-8419-8824ЖулеваЛеокадия ЮрьевнаZhulevaLeokadia Y.alvaltim@gmail.comКолтуновИгорь ЕфимовичKoltunovIgor E.alvaltim@gmail.comПетряйкинаЕлена ЕфимовнаPetriaikinaElena E.alvaltim@gmail.comРыбкинаИрина ГеоргиевнаRybkinaIrina G.

Врач

alvaltim@gmail.comГаряеваИрина ВикторовнаGaryaevaIrina V.

Врач

alvaltim@gmail.comГугучияСаломэ ЛериевнаGuguchiaSalome L.

Врач

alvaltim@gmail.comШимароваАнгелина БорисовнаShimarovaAngelina B.

Врач

alvaltim@gmail.comБуллихАртем ВладимировичBullikhArtiom V.alvaltim@gmail.comКоломинаИрина ГеннадьевнаKolominaIrina G.

Врач

MD

alvaltim@gmail.comЕвсюковаЕвгения АлександровнаEvsyukovaEvgenia A.

Врач

MD

alvaltim@gmail.comБукинСергей СергеевичBukinSergei S.

Врач

alvaltim@gmail.comЕгарминаНаталья НиколаевнаEgarminaNatalia N.

Врач

alvaltim@gmail.comАрбатскаяНаталья ЮрьевнаArbatskayaNatalia Y.alvaltim@gmail.comЯновскаяЭлина ЮрьевнаYanovskayaElina Y.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-2108-0658ПопенкоВладимир ИвановичPopenkoVladimir I.alvaltim@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-7814-8409АрхипкинАлександр АлексеевичArkhipkinAlexander A.alvaltim@gmail.comФГБОУ ВО Первый московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава РоссииРоссияI.M.Sechenov First Moscow State Medical UniversityRussian FederationEndocrinology Research CentreРоссияEndocrinology Research CentreRussian FederationФГБУ Эндокринологический научный центр Минздрава РоссииРоссияEndocrinology Research CentreRussian FederationФГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава РоссииРоссияRussian Medical Academy of Postgraduate EducationRussian FederationГБУЗ Морозовская детская городская клиническая больница Департамента здравоохранения МосквыРоссияMorozov Children Clinical HospitalRussian FederationГБУЗ Детская городская клиническая больница им. З.А. Башляевой Департамента здравоохранения МосквыРоссияBashliaeva Children Clinical HospitalRussian FederationФГБОУ ВО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава РоссииРоссияPirogov Russian National Research Medical UniversityRussian FederationФАНО ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, МоскваРоссияEngelhardt Institute of Molecular Biology Russian Academy of SciencesRussian FederationООО Научный Центр ЭФиСРоссияScientific Center EFIS Ltd.Russian Federation201620092016194Том 19, №4(2016)331340Copyright © Тимофеев А.В., Горст К.А., Уваров В.Ю., Пронина Е.А., Витебская А.В., Попович А.В., Тюльпаков А.Н., Зубкова Н.А., Гиоева О.А., Тихонович Ю.В., Ильин А.В., Латышев О.Ю., Окминян Г.Ф., Каболова К.Л., Канокова Д.А., Жулева Л.Ю., Колтунов И.Е., Петряйкина Е.Е., Рыбкина И.Г., Гаряева И.В., Гугучия С.Л., Шимарова А.Б., Буллих А.В., Коломина И.Г., Евсюкова Е.А., Букин С.С., Егармина Н.Н., Арбатская Н.Ю., Яновская Э.Ю., Попенко В.И., Архипкин А.А., 20162016Тимофеев А.В., Горст К.А., Уваров В.Ю., Пронина Е.А., Витебская А.В., Попович А.В., Тюльпаков А.Н., Зубкова Н.А., Гиоева О.А., Тихонович Ю.В., Ильин А.В., Латышев О.Ю., Окминян Г.Ф., Каболова К.Л., Канокова Д.А., Жулева Л.Ю., Колтунов И.Е., Петряйкина Е.Е., Рыбкина И.Г., Гаряева И.В., Гугучия С.Л., Шимарова А.Б., Буллих А.В., Коломина И.Г., Евсюкова Е.А., Букин С.С., Егармина Н.Н., Арбатская Н.Ю., Яновская Э.Ю., Попенко В.И., Архипкин А.А.Timofeev A.V., Gorst K.A., Uvarov V.Y., Pronina E.A., Vitebskaya A.V., Popovich A.V., Tiulpakov A.N., Zubkova N.A., Gioeva O.A., Tikhonovich Y.V., Ilin A.V., Latyshev O.Y., Okminjan G.F., Kabolova K.L., Kanokova J.A., Zhuleva L.Y., Koltunov I.E., Petriaikina E.E., Rybkina I.G., Garyaeva I.V., Guguchia S.L., Shimarova A.B., Bullikh A.V., Kolomina I.G., Evsyukova E.A., Bukin S.S., Egarmina N.N., Arbatskaya N.Y., Yanovskaya E.Y., Popenko V.I., Arkhipkin A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.dia-endojournals.ru/jour/article/view/8032Цель

Цель. Определить операционные параметры и диагностическую ценность иммунофлюоресцентного теста на антитела к островковым клеткам (islet cell antibodies, ICA), радиоиммунного теста на антитела к глутаматдекарбоксилазе (glutamic acid decarboxylase antibodies, GADA) и иммуноферментных тестов на антитела к инсулину (insulin antibodies, IA) и к тирозинфосфатазе (cytoplasmic islet cell antibody 512, IA-2A).

Материалы и методы

Материалы и методы. Тесты на антитела провели у 438 детей и подростков с диагнозом «сахарный диабет (СД) 1 типа» и у 891 человека без этого заболевания. Для определения ICA использовали классический непрямой иммуно­флюоресцентный метод Международного фонда детского диабета, для определения GADA, IA-2A и IA – тест-системы Immunotech IRMA Anti-GAD, Medizym Anti-IA2 и Orgentec Anti-Insulin соответственно. Диагностическую чувствительность (ДЧ), диагностическую специфичность (ДС), предсказательную ценность положительного и отрицательного результатов (ПЦПР и ПЦОР) тестов оценивали по таблицам сопряженности признаков, диагностическую точность (ДТ) тестов оценивали по площадям под характеристическими кривыми (AUC, area under receiver operating curve).

Результаты

Результаты. Наибольшей диагностической ценностью обладает тест на ICA (ДЧ=88%, ДС=96%, ПЦПР=96%, ПЦОР=94%, AUC=0,94). На втором месте находится тест на IA-2A (ДЧ=66%, ДС=98%, ПЦПР=98%, ПЦОР=59%, AUC=0,82), на третьем – тест на GADA (ДЧ=73%, ДС=84%, ПЦПР=75%, ПЦОР=83%, AUC=0,79). Тест на IA характеризуется очень низкой ДЧ (4,3%) и отсутствием ДТ (AUC=0,5).

Заключение

Заключение. Охарактеризованные нами тесты на ICA, IA-2A и GADA рекомендуется применять в диагностике СД 1 типа и дифференциальной диагностике СД. Тест на IA с применением тест-системы Orgentec Anti-Insulin не рекомендуется использовать в клинической практике.

 

 

Objective

Objective. To estimate performance characteristics and diagnostic value of immunofluorescent islet cell antibody (ICA) assay, immunoradiometric glutamic acid decarboxylase antibody (GADA) assay, and ELISA tyrosine phosphatase IA-2 antibody (IA-2A) and insulin antibody (IA) assays.

Research Design and Methods. Antibodies were tested in 438 children and adolescents with newly diagnosed diabetes mellitus (DM) type 1, and in 891 subjects without DM type 1. ICA were determined by the classic indirect immunofluorescent method recommended by the Juvenile Diabetes Foundation International, GADA were determined with the Immunotech IRMA Anti-GAD kit, and IA-2A and IA were determined with Medizym Anti-IA2 and Orgentec Anti-Insulin ELISA kits, respectively. Sensitivity (Se), specificity (Sp), positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) of the tests were estimated with contingency tables. Diagnostic accuracy was estimated from areas under receiver operating curves (AUC).

Results

Results. ICA test was of the greatest diagnostic value (Se=88%, Sp=96%, PPV=96%, NPV=94%, AUC=0,94), followed by IA-2A (Se=66%, Sp=98%, PPV=98%, NPV=59%, AUC=0,82) and GADA (Se=73%, Sp=84%, PPV=75%, NPV=83%, AUC=0,79). IA test exhibited a very low Se (4,3%) and lacked diagnostic accuracy (AUC=0,5).

Conclusions

Conclusions. We recommend to use ICA, IA-2A and GADA tests surveyed in our study for diagnosis of DM type 1 and differential diagnosis of DM. We don’t recommend IA testing with an Orgentec Anti-Insulin ELISA kit for usage in clinical practice.

 

 

сахарный диабетсахарный диабет 1 типадифференциальный диагнозаутоантителаантитела к островковым клеткамантитела к глутаматдекарбоксилазеантитела к тирозинфосфатазеантитела к инсулинуиммунофлюоресцентный анализрадиоиммунный анализиммуноdiabetes mellitusdiabetes mellitus type 1differential diagnosisautoantibodiesislet cell antibodyglutamic acid decarboxylase antibodytyrosine phosphatase antibodyinsulin antibodyimmunofluorescence assayradioimmune assayimmunoenzyme assaGrant by Russian Foundation for Basic Research (94-04-13361, 96-04-49623, 09-04-01344); Grant byGrant of the State scientific-technical programme "Russians' Health" (project 14),grants by the Russian Foundation for Basic Research (94-04-13361, 96-04-49623, 09-04-01344)ReferencesДедов И.И., Шестакова М.В., Галстян Г.Р., и др. Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом. Под редакцией И.И. Дедова, М.В. Шестаковой (7-й выпуск) // Сахарный диабет. – 2015. – Т. 18. – №1S – C. 1-112. [Dedov II, Shestakova MV, Galstyan GR, et al. Standards of specialized diabetes care. Edited by Dedov I.I., Shestakova M.V. (7th edition). Diabetes mellitus. 2015;18(1S):1-112. (In Russ).] doi: 10.14341/dm20151s1-112Дедов И.И., Шестакова М.В., Галстян Г.Р., и др. Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом. Под редакцией И.И. Дедова, М.В. Шестаковой (7-й выпуск) // Сахарный диабет. – 2015. – Т. 18. – №1S – C. 1-112. [Dedov II, Shestakova MV, Galstyan GR, et al. Standards of specialized diabetes care. Edited by Dedov I.I., Shestakova M.V. (7th edition). Diabetes mellitus. 2015;18(1S):1-112. (In Russ).] doi: 10.14341/dm20151s1-112Федеральные клинические рекомендации (протоколы) по ведению детей с эндокринными заболеваниями. / Под ред. Дедова И.И., Петерковой В.А. – М.: Практика; 2014. [Federal’nye clinicheskie rekomendatsii (protokoly) po vedeniyu detei s endokrinnymi zabolevanyiami. Ed by Dedov II, Peterkova VA. Moscow: Practica; 2014. (In Russ).]Федеральные клинические рекомендации (протоколы) по ведению детей с эндокринными заболеваниями. / Под ред. Дедова И.И., Петерковой В.А. – М.: Практика; 2014. [Federal’nye clinicheskie rekomendatsii (protokoly) po vedeniyu detei s endokrinnymi zabolevanyiami. Ed by Dedov II, Peterkova VA. Moscow: Practica; 2014. (In Russ).]Instruction For Use ORG 520 Anti-Insulin. Available from: http://products.orgentec.com/pdfs/ORG%20520_IFU_EN_QM113149_2013-12-16_1.2.pdf. Accessed August 1, 2016.Instruction For Use ORG 520 Anti-Insulin. Available from: http://products.orgentec.com/pdfs/ORG%20520_IFU_EN_QM113149_2013-12-16_1.2.pdf. Accessed August 1, 2016.IRMA anti-GAD IM3651-IM3651 immunoradiometric assay for the quantitative determination of anti-GAD autoantibodies in human serum. Available from: https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/page/techdocSearch. Accessed August 1, 2016.IRMA anti-GAD IM3651-IM3651 immunoradiometric assay for the quantitative determination of anti-GAD autoantibodies in human serum. Available from: https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/page/techdocSearch. Accessed August 1, 2016.Medizym anti-IA2 Order Number 3803. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the quantitative determination of autoantibodies to protein tyrosine phosphatase IA2 (IA2 Ab) in human serum. Available from: http://www.medipan.de/en/products/eia/#c450. Accessed August 1, 2016.Medizym anti-IA2 Order Number 3803. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the quantitative determination of autoantibodies to protein tyrosine phosphatase IA2 (IA2 Ab) in human serum. Available from: http://www.medipan.de/en/products/eia/#c450. Accessed August 1, 2016.Ригельман Р.К. Как избежать врачебных ошибок. – М.: Практика; 1994. [Riegelman RK. The art of medical decision making. Moscow: Practica; 1994. (In Russ)].Ригельман Р.К. Как избежать врачебных ошибок. – М.: Практика; 1994. [Riegelman RK. The art of medical decision making. Moscow: Practica; 1994. (In Russ)].Дедов И.И., Шестакова М.В., Викулова О.К. Государственный регистр сахарного диабета в Российской Федерации: статус 2014 г. и перспективы развития // Сахарный диабет. – 2015. – Т. 18. – №3 – C. 5-22. [Dedov II, Shestakova MV, Vikulova OK. National register of diabetes mellitus in Russian Federation. Diabetes mellitus. 2015;18(3):5-22. (In Russ).] doi: 10.14341/DM201535-22Дедов И.И., Шестакова М.В., Викулова О.К. Государственный регистр сахарного диабета в Российской Федерации: статус 2014 г. и перспективы развития // Сахарный диабет. – 2015. – Т. 18. – №3 – C. 5-22. [Dedov II, Shestakova MV, Vikulova OK. National register of diabetes mellitus in Russian Federation. Diabetes mellitus. 2015;18(3):5-22. (In Russ).] doi: 10.14341/DM201535-22Zweig MH, Campbell G. Receiver-operating characteristic (ROC) plots: a fundamental evaluation tool in clinical medicine. Clin Chem. 1993;39(4):561-577.Zweig MH, Campbell G. Receiver-operating characteristic (ROC) plots: a fundamental evaluation tool in clinical medicine. Clin Chem. 1993;39(4):561-577.Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. – М.: Медиа Сфера; 2006. [Rebrova OYu. Statisticheskii analiz meditsinskih dannyh. Moscow: Media Sfera; 2006. (In Russ).].Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. – М.: Медиа Сфера; 2006. [Rebrova OYu. Statisticheskii analiz meditsinskih dannyh. Moscow: Media Sfera; 2006. (In Russ).].MedCalc statistical software version 16.4.3, MedCalc Software bvba, Ostend, Belgium. Available from: https://www.medcalc.org; 2016. Accessed August 1, 2016.MedCalc statistical software version 16.4.3, MedCalc Software bvba, Ostend, Belgium. Available from: https://www.medcalc.org; 2016. Accessed August 1, 2016.Verge CF, Stenger D, Bonifacio E, et al. Combined use of autoantibodies (IA-2 autoantibody, GAD autoantibody, insulin autoantibody, cytoplasmic islet cell antibodies) in type 1 diabetes: Combinatorial Islet Autoantibody Workshop. Diabetes. 1998;47(12):1857-1866. doi: 2337/diabetes.47.12.1857Verge CF, Stenger D, Bonifacio E, et al. Combined use of autoantibodies (IA-2 autoantibody, GAD autoantibody, insulin autoantibody, cytoplasmic islet cell antibodies) in type 1 diabetes: Combinatorial Islet Autoantibody Workshop. Diabetes. 1998;47(12):1857-1866. doi: 2337/diabetes.47.12.1857Bingley PJ, Bonifacio E, Mueller PW. Diabetes Antibody Standardization Program: First Assay Proficiency Evaluation. Diabetes. 2003;52(5):1128-1136. doi: 10.2337/diabetes.52.5.1128Bingley PJ, Bonifacio E, Mueller PW. Diabetes Antibody Standardization Program: First Assay Proficiency Evaluation. Diabetes. 2003;52(5):1128-1136. doi: 10.2337/diabetes.52.5.1128Greenbaum CJ, Wilkin TJ, Palmer JP, et al. Fifth International Serum Exchange Workshop for Insulin Autoantibody (IAA) Standardization. Diabetologia. 1992;35(8):798-800. doi: 10.1007/bf00429105Greenbaum CJ, Wilkin TJ, Palmer JP, et al. Fifth International Serum Exchange Workshop for Insulin Autoantibody (IAA) Standardization. Diabetologia. 1992;35(8):798-800. doi: 10.1007/bf00429105Fabris M, Zago S, Liguori M, et al. Anti-zinc transporter protein 8 autoantibodies significantly improve the diagnostic approach to type 1 diabetes: an Italian multicentre study on paediatric patients. Auto Immun Highlights. 2015;6(1-2):17-22. doi: 10.1007/s13317-015-0068-4Fabris M, Zago S, Liguori M, et al. Anti-zinc transporter protein 8 autoantibodies significantly improve the diagnostic approach to type 1 diabetes: an Italian multicentre study on paediatric patients. Auto Immun Highlights. 2015;6(1-2):17-22. doi: 10.1007/s13317-015-0068-4

The authors declare that there are no conflicts of interest present.